2012-1224
2012-1218
2012-1214
(一)动物的选择目前应用zui广的是小白鼠和大白鼠,尤以小白鼠为好。就品系而言以Balb/c小白鼠应用zui广,因为所有的小白鼠骨髓瘤系均从Balb/c小白鼠系诱导出来。Balb/c系小白鼠必须用纯系的,雌雄均可,以8~12周龄为宜。大白鼠也可,能产生较多量的单抗体。现在已经在小鼠杂交瘤的基础上,发展了小鼠-大鼠,小鼠-人以及人-人杂交瘤技术。(二)免疫一般而言,抗原的纯度不很重要,特别是免疫原性较强的抗原。免疫程序、剂量和方法是关系到是否能得到所需要的单抗体的关键之一。正常...
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2012-1213
一、分析灵敏度1、检测系统可检测的样本中zui低分析物浓度;2、检测低限:定性含义;3、功能灵敏度:定量含义。二、检测低限(LLD)1、定义:样本单次检测可以达到的非空白检测响应量对应的分析物量。检测系统或方法对小于或等于检测低限的分析物量只能报告“无分析物检出”。2、计算:通常估计95%和97.5%的两种可能性①95%可能性:LLD=X(空白)+2×SD(空白)②99.7%可能性:LLD=X(空白)+3×SD(空白)三、功能灵敏度(FS)1、定义:以天间重复CV为20%时对...
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2012-1210
一、试剂空白吸光度每种试剂都有一定的空白吸光度范围,其改变往往提示该试剂的变质;原则上,吸光度上升的反应,其试剂空白吸光度越低越好,不能超过一个高限。反之亦然;试剂空白吸光度限值,常作为程序参数输入仪器,如经核查超限,仪器会自动报警,提示更换试剂;举例:利用Trinder反应为原理的检测试剂会因含酚类物质被氧化为醌而变为红色。二、试剂空白吸光度测试方法1、测定待检试剂在测定波长、37℃±1℃条件下检测蒸馏水的吸光度A;2、将试剂更换成蒸馏水,再测定吸光度B;3、...
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2012-125
化学试剂的种类很多,世界各国对化学试剂的分类和分级的标准不尽一致。IUPAC(InternationalUnionofPureandAppliedChemistry理论和应用化学联合会(IUPAC)对化学标准物质的分类为:1、*:原子量标准。级zui接近的基准物质。2、B级:和*zui接近的基准物质。3、C级:含量为100+-0.02%的标准试剂4、D级:含量为100+-0.05%的标准试剂5、E级:以C级或D级为标准对比测定得到的纯度的试剂化学试剂按用途可分为标准试剂,一般...
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2012-123
2012-1128
1、免疫脾细胞的制备制备单克隆抗体的动物多采用纯系Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。2、骨髓瘤细胞的培养与筛选在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性(恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活)。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养,融合前24h换液一次,使骨髓瘤细胞处于对数生长期。3、细胞融合的关键:①技术上的误差常常导致融合的失败。②融合试...
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