血清的灭活与分装

一、化冻将血清（FetalBovineSerum，Hyclone）从－20℃冰箱取出，放于4℃冰箱化冻过夜；也可室温（或浸于自来水中）化冻，化冻后若不马上灭活，可以放入4℃冰箱暂时保存；二、灭活1、放入室温的水浴锅内开始加热（同时放入一个内装200ml自来水的血清瓶，插入一根温度计，温度监控以此为准）；2、当温度计显示56℃时，控制在此温度30分钟±3分钟；若不小心使温度上升超过56℃，则：若仍未超过60℃，且时间很短（比如：不超过5分钟），则仍可使用；若超过6...

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ES细胞的冻存操作

1、常规方法将细胞消化成单细胞悬液；2、转入试管，1000转/分钟离心5分钟；3、配适量冻存液（为含10%二甲亚砜（DMSO），10%FBS的DMEM培养液）；4、弃上清，每管加入1ml冻存液，吹打成细胞悬液（只要使ES细胞分散成3—5个细胞的小团块即可），转入冻存管，作好标签；5.放入程序冻存盒内24小时后转入液氮罐中冻存。相关产品信息：冻存管,冻存盒,管鼓盖,加样槽,PCR板,PCR管架,Sigma现货,Abcam抗体,GE试剂,Amresco试剂

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使用液氮应注意的事项

1、准备冻存管、冻存盒放置需液氮中保存的样品。2、液氮中有三个取液氮容器，不宜直接将冻存管放于液氮罐中，这样会使冻存管漂浮起来。固可用纱布、棉线将取氮容器口封住，保存样品。3、取样品时，需要使用研钵。研钵在使用前，需清洗，并用纯酒精灼烧以充分灭菌。在研磨液氮保存的样品时，需加入液氮，迅速研磨，待组织变软，再加少量液氮，再研磨。如此三次。可用消毒过的钥匙将研钵中的组织样品转入EP管中。介于所取的样品不能*转移到EP管中，故而在取样时需多取样品，以免不够。4、新买的液氮罐需用一定...

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冰箱存放样品的几点建议

一、提高冰箱空间使用率：1、在冰箱中制作必要的支架；2、使用冻存盒，替代各种手套、袋子、板架；3、采用节省空间的冻存管。二、对于长期储存的重要样品：实验室重要的菌种、组织、蛋白等样品建议可选择二维编码管（2D管）进行储存，避免样本/信息的丢失、错用、误用，同时实现样本的有效管理。相关产品信息：冻存管,冻存盒,管鼓盖,加样槽,PCR板,PCR管架,Sigma现货,Abcam抗体,GE试剂,Amresco试剂

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样品复苏注意事项

一、样品复苏时的注意事项1、注意做好个人防护，如护目镜、面罩、手套、防护服，避免炸伤2、尽量使用镊子3、水浴锅/烧杯上覆盖毛巾二、样品复苏时1、对于未经保护的冻存管，切忌快速扔进水浴中。2、冻存管从液氮液相取出后必须在液氮气相中储存24h，这样可以使得液氮从冻存管中慢慢的蒸发和逃逸，从而降低冻存管中的压力。3、冻存管从液氮液相取出后快速放置于-20度冰箱30min，再进行水浴复苏。4、冻存管从液氮取出后，用手轻轻拧松管盖，使液氮蒸发后再进行水浴复苏。5、对于不需水浴复苏的样品...

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冻存操作的注意事项

一、与液氮接触的样品需在操作时注意：1、急冻或长期液氮储存的样品会接触到液氮；2、不建议用微量离心管；3、对管口进行密封，避免液氮渗透；4、液氮渗入的风险：炸管、样品间交叉污染；5、转移过程中注意使用冰盒。二、生物安全柜中操作冻存管：1、单手操作，避免污染，解决静电、管子滑落等问题；2、用力适中，避免扭力过度造成脱丝，影响密封效果。三、注意做好标记：1、管盖和管壁均做标记；2、推荐使用冷冻标签纸和低温记号笔。相关产品信息：冻存管,冻存盒,管鼓盖,加样槽,PCR板,PCR管架,...

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如何保存菌株？

1、使用前用油性白板笔在每个冻存管上标记上细菌的名称，每支冻存管只可接种。2、在无菌条件下,打开冻存管的螺旋瓶盖。3、用接种环挑取新鲜细菌纯培养物（18-24小时）,放入冻存液中。拧紧瓶盖,来回颠倒使细菌乳化,配成大约3-4麦氏比浊度的菌悬液（一般一个平板的纯培养物可保存两管）。此时细菌悬液会吸附在小瓷珠内外表面，随后进行高压灭菌消毒处理。4、用无菌移液器将冻存管中的菌悬液尽量吸出。吸出的菌悬液应放入消毒液中。5、拧紧瓶盖.记录下接种细菌的详细情况。6、将接种完细菌的冻存管放...

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细胞的冻存操作

一、用品1、5%胰蛋白酶2、含10%~20%血清培养液3、DMSO或无色新鲜甘油（15磅蒸汽高压消毒）4、吸管、离心管、冻存管二、操作步骤1、从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但是对数生长期的细胞，已将长满的细胞冻存后生存率低。在冻存前一天换一次培养液。2、用胰蛋白酶把单层生长的细胞消化下来，悬浮生生长的细胞则不需要处理。依据传代方法把消化好的细胞收集于离心管并计数，离心。3、去除胰蛋白酶及旧的培养液，加入配好的冻存培养液（含10%的DMSO或甘油），...

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