生化试剂的校准与结果溯源性

酶的校正要满足在同一方法学、同一测定条件、与理论计算的FACTOR值差异不大，没有发现有明显影响因素，方可进行校正。检验结果溯源性，得建立一个可靠的参考系统作为准确性基础，然后将准确性转移到常规方法测定中去，使常规方法测定结果可溯源到参考系统所提供的准确性基础上来。在实现溯源性目标过程中，永远以患者新鲜标本为实验对象，以方法学对比试验方法为验证手段。方法学对比试验常采用回归方程进行统计分析，假如斜率接近1，截距较小，这意味着实验室常规方法对标本测定结果和溯源目标参考系统对标本...

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如何进行细胞周期的测定

一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间.从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期.细胞周期反应了细胞增殖速度.单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期.测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法,细胞计数法等,这里介绍一种利用BrdU渗入测定细胞周期的方法.BrdU（5-溴脱氧尿嘧啶核苷）加入培养基后,可做为细胞DNA复制的原料,经过两个细胞周期后,细胞中两条单链均含BrdU的DNA将占l/2,反映在染色体上应表现为...

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抗体按理化性质和生物学功能分类

抗体按理化性质和生物学功能，可将其分为IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五类。1、IgM抗体是免疫应答中首先分泌的抗体。它们在与抗原结合后启动补体的级联反应。它们还把入侵者相互连接起来，聚成一堆便于巨噬细胞的吞噬;2、IgG抗体激活补体，中和多种毒素。IgG持续的时间长，是*能在母亲妊娠期穿过胎盘保护胎儿的抗体。他们还从乳腺分泌进入初乳，使新生儿得到保护;3、IgA抗体进入身体的黏膜表面，包括呼吸、消化、生殖等管道的黏膜，中和感染因子。还可以通过母乳的初乳把这种抗体输送到...

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细胞冻存和复苏原则及程序

一、冻存和复苏的原则：慢冻快融当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器脱水，细胞中可溶性物质浓度升高，并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生大的冰晶；相反结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。二、标准程序当温度在-25℃以上时，1～2℃/min当温度达-25℃以下时，5～10℃/min，当温度达-100℃时，可迅速放入液氮中三、简易程序将冻存管（管口要朝上）放入纱布袋内，纱...

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ELISA操作之标本的采取和保存、保温

一、标本的采取和保存大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，HRP为标记的ELISA测定中，以溶血标本可能会增加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。一般说来，在5天内测定的血清标本可放置于4℃，标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG聚合，使间接法的试剂本底加深。超过一周测定的需－20℃保存。冻结血清融解后，蛋白质局部浓缩，分布不均...

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单克隆抗体的应用　

单克隆抗体问世以来，由于其*的特征已迅速应用于医学很多领域。主要表现在以下几个方面。1．检验医学诊断试剂作为检验医学实验室的诊断试剂，单克隆抗体以其特异性强、纯度高、均一性好等优点，广泛应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞仪等技术。并且单克隆抗体的应用，很大程度上促进了商品化试剂盒的发展。目前，应用单克隆抗体制作的商品化试剂盒广泛应用于：①病原微生物抗原、抗体的检测；②肿瘤抗原的检测；③免疫细胞及其亚群的的检测；④激素测定；⑤细胞因子的测定。单克隆抗体对抗...

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玻璃仪器清洗规程

1、试管、烧杯、漏斗等玻璃仪器如无特殊要求，用洗衣粉刷洗内壁，自来水冲净后，纯净水润洗三次，以内壁不挂水珠为准，自然晾干。有效期为七日，过期后使用时重新洗涤。2、液相色谱、气相色谱使用的进样瓶洗涤方法和原则与滴定管相同。3、效价用双碟用完后，先浸入来苏水中24h，取出超声20分钟，自来水逐个冲净，纯净水润洗后，以碟上不挂水珠为准自然晾干，装入桶内。160℃干烤2小时灭菌备用。有效期为七日，过期后使用时重新160℃干烤2小时即可。4、微生物限度测定用三角瓶、刻度吸管、试管、双碟...

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抗体的基因重排

抗体的L链是由C、V、J三个基因簇编码的，H链由C、V、D、J四个基因簇编码的。是编码可变区，300个种类；编码高变区,有15～20个种类；编码连接V、V有DJC的结合区，4～5个种类；编码恒定区，有C仅有一种。这些外显子通过多种多样的重排，所合成出的肽链，还要再进一步进行L和H链组合，这样zui后生成的抗体种类就非常多了。抗体基因重排是发生在淋巴细胞分化的时候。按理化性质和生物学功能，可将其分为IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五类。1、IgM抗体是免疫应答中首先分泌的...

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