化学试剂的分类及分级

化学试剂的种类很多，世界各国对化学试剂的分类和分级的标准不尽一致。IUPAC（InternationalUnionofPureandAppliedChemistry理论和应用化学联合会（IUPAC）对化学标准物质的分类为：1、*：原子量标准。级zui接近的基准物质。2、B级：和*zui接近的基准物质。3、C级：含量为100＋－0.02%的标准试剂4、D级：含量为100＋－0.05%的标准试剂5、E级：以C级或D级为标准对比测定得到的纯度的试剂化学试剂按用途可分为标准试剂，一般...

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饲养层细胞的培养

一、主要实验材料1、培养液为F-DMEM。2、小鼠周龄为7～8w的性成熟母小鼠和周龄为8w的种公鼠。二、小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）的培养1、小鼠胚胎的准备①性成熟母小鼠与种公鼠按1公（♂）:2母（♀）比例合笼。②每天早上观察母小鼠阴道口。有乳白色或蛋黄色冻胶状物（阴道栓）即确定为怀孕。④见栓当天上午定为怀孕的0.5d。③取怀孕12.5～14.5d母鼠,断颈处死，无菌条件下暴露子宫。馊用镊子提起近子宫颈端,分离子宫系膜,剪断子宫角。⑤取出整个子宫,在无菌滤纸上吸干血迹,置于有...

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多克隆抗体的制备过程

1、免疫脾细胞的制备制备单克隆抗体的动物多采用纯系Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。2、骨髓瘤细胞的培养与筛选在融合前，骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选，防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性（恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活）。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养，融合前24h换液一次，使骨髓瘤细胞处于对数生长期。3、细胞融合的关键:①技术上的误差常常导致融合的失败。②融合试...

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抗体的四种定义

抗体monoclonalantibody；McAb1、定义1：能与相应抗原（表位）特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。所属学科：免疫学（一级学科）；免疫系统（二级学科）；免疫分子（三级学科）2、定义2：在人和动物体内，由于抗原或半抗原入侵刺激机体而在细胞中产生的免疫球蛋白。能可逆、非共价、特异地与相应抗原结合，形成抗原-抗体复合体。所属学科：生物化学与分子生物学（一级学科）；总论（二级学科）3、定义3：机体内B细胞在抗原刺激下产生的具有特异性功能的球蛋白。所属学科：水产学（一级...

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细胞培养技术在生物医学研究中的优缺点

一、优点1、直接观察活细胞的形态结构和生命活动。用于细胞学、遗传学、免疫学、实验医学和肿瘤学等多种学科研究。2、直接观察细胞的变化可便于摄影。3、研究细胞种类如低等到高等到人类、胚胎到成体、正常组织到肿瘤。4、便于使用各种技术：相差、荧光、电镜、组化、同位素标记等方法观察和研究细胞状况。5、是分子生物学和基因工程学的研究对象，也是其主要的组成部分。6、易于施用物理、化学生物的实验研究。7、易于提供大量生物性状相似的实验对象,耗资少比较经济。8、成为生物制品单克隆抗体生产和基因...

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细胞传代注意事项

1、紫外消毒过程中会产生臭氧分子，对人体有害。一般情况下，消毒后至少半小时后再进入。2、所有的实验器材都要经过消毒处理；所有的细胞操作都在安全柜中进行，每一步都要注意不能用手碰到瓶口，培养液不能碰到瓶口，拿培养瓶时要使培养瓶的瓶口微微翘起。3、细胞消化时间不能太长，要让细胞尽快脱离不舒服的环境；离心时离心机转速不能太高，实验前要设定好离心转速和时间；重悬细胞时要保证细胞*混匀，在显微镜下观察细胞是一个一个的。4、传代培养时要注意无菌操作并防止细胞之间的交叉污染。所有操作要尽量...

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血清的化冻、灭活与分装

1、化冻将血清（FetalBovineSerum，Hyclone）从－20℃冰箱取出，放于4℃冰箱化冻过夜；也可室温（或浸于自来水中）化冻，化冻后若不马上灭活，可以放入4℃冰箱暂时保存；2、灭活①放入室温的水浴锅内开始加热（同时放入一个内装200ml自来水的血清瓶，插入一根温度计，温度监控以此为准）；②当温度计显示56℃时，控制在此温度30分钟±3分钟；若不小心使温度上升超过56℃，则：若仍未超过60℃，且时间很短（比如：不超过5分钟），则仍可使用；若超过60℃...

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细胞株冻存条件及方法

1、冻存条件：建议采用40-50%FBS+8%-10%DMSO+该细胞株无血清培养基2、冻存方法：①梯度冻存：4℃——1h；-20℃——30min；-80℃——过夜②使用冻存盒：直接放入-80℃冰箱中过夜（有些细胞不适应此种方法）3、复苏方法：①打开水浴，将培养基放入水浴中，待其稳定至37℃；②细胞从液氮内取出后，应快速将细胞放于37℃水浴中，轻轻振摇，使其溶化，（尽量避免溶化前冻存管脱离水浴）；③将溶化后将细胞冻存悬液离心，转速1000rpm，3min,后弃去上清，使细胞重...

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