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更新时间:2026-03-09
厂商性质:生产厂家
访 问 量 :408
400-968-7988
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人丝裂原活化蛋白激酶MKK6试剂盒(Human Mitogen-Activated Protein Kinase Kinase 6 Kit,MKK6 Kit,又称MAP2K6 Kit),是基于酶联免疫吸附法(ELISA)原理研发的体外诊断/科研检测试剂盒,可特异性检测人血清、血浆、组织匀浆及细胞培养上清中人丝裂原活化蛋白激酶MKK6(MAP2K6)的含量,经特异性验证、灵敏度测试及重复性实验确认,无交叉反应,检测结果准确可靠,无试剂降解、杂菌污染等问题。MKK6(MAP2K6)是丝裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK)家族成员,核心功能是作为P38 MAPK通路的上游调控激酶,通过磷酸化激活P38 MAPK,介导细胞应激反应、炎症反应、细胞凋亡及分化调控,其异常表达与炎症性疾病、肿瘤、神经退行性疾病、心血管疾病密切相关,是评估P38 MAPK信号通路激活状态、相关疾病辅助诊断、病情监测及抗炎/抗肿瘤药物筛选的重要指标。本试剂盒核心特征是特异性强、操作便捷、检测快速,可精准定量样本中MKK6含量,广泛应用于临床检验、分子生物学科研、抗炎/抗肿瘤药物筛选、信号通路机制研究等领域,是临床、科研领域的核心信号通路调控相关检测工具。
本试剂盒的核心检测原理,基于酶联免疫吸附法(ELISA),聚焦人丝裂原活化蛋白激酶MKK6(MAP2K6)的抗原抗体特异性结合特性,结合信号通路调控相关指标检测的精准需求设计:试剂盒预先将MKK6特异性抗体包被于酶标板上,加入待检测样本(血清、血浆等)后,样本中的MKK6会与酶标板上的抗体特异性结合,形成抗原-抗体复合物;洗涤去除未结合的杂蛋白、细胞碎片、其他MAPKK家族成员(如MKK3)及无关蛋白后,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的MKK6二抗,与复合物特异性结合,形成“包被抗体-MKK6-酶标二抗"的三明治结构;再加入底物液(TMB),HRP催化底物发生显色反应,显色强度与样本中MKK6的含量呈正相关,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),对照标准曲线即可计算出样本中MKK6的具体含量。检测流程规范:样本采集后需及时处理(血清/血浆离心分离、细胞上清收集、组织匀浆破碎离心),按照试剂盒说明书稀释样本;酶标板平衡至室温后,依次加入标准品、样本及空白对照,37℃孵育30分钟;洗涤3-5次后加入酶标二抗,37℃孵育20分钟;再次洗涤后加入底物液,37℃避光孵育15分钟;加入终止液终止反应,10分钟内用酶标仪测定OD值,计算检测结果。
本产品针对人丝裂原活化蛋白激酶MKK6(MAP2K6)检测需求优化制备,核心特点如下:
1. 特异性强:采用高特异性MKK6单克隆抗体,可特异性结合样本中的MKK6,不与MKK3、MKK4等其他MAPKK家族成员、其他激酶及杂蛋白发生交叉反应,检测特异性>99%,确保检测结果精准,有效规避信号通路调控相关检测中的干扰因素;
2. 质控严格:每批次试剂盒均通过灵敏度、重复性、特异性及稳定性检测,附完整QC报告,确保批内变异系数(CV)<8%、批间变异系数(CV)<10%,检测灵敏度可达0.1ng/mL,符合临床检测与科研标准;
3. 操作便捷:试剂盒含全套检测试剂(包被酶标板、MKK6标准品、酶标二抗、底物液、终止液、洗涤液等),无需额外配制核心试剂,步骤简单,全程可在2.5小时内完成,适配常规实验室操作,新手易上手;
4. 样本兼容广:可适配人血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆四种核心样本类型,样本用量少(仅需50μL/孔),无需复杂预处理,仅需简单离心、稀释即可检测,适配肿瘤、炎症等相关科研与临床多场景样本;
5. 适配场景广:可用于类风湿关节炎、炎症性肠病等炎症性疾病,肺癌、肝癌等肿瘤的辅助诊断与疗效监测,P38 MAPK信号通路调控机制研究,抗炎、抗肿瘤、抗应激药物筛选,以及临床检验、分子生物学、肿瘤学、免疫学科研实验室的常规检测。
本试剂盒适配人源样本的体外检测与科研实验,适用样本类型明确:人血清样本(静脉采血后离心分离,避免溶血,溶血会干扰检测结果)、人血浆样本(EDTA或肝素抗凝,离心分离)、人细胞培养上清样本(肿瘤细胞、免疫细胞、肝细胞对数期上清,离心去除杂质)、人组织匀浆样本(肿瘤组织、肝组织、心肌组织、炎症组织等破碎后离心取上清);实验场景涵盖类风湿关节炎、炎症性肠病等炎症性疾病,肺癌、肝癌等肿瘤的辅助诊断与疗效监测,P38 MAPK信号通路调控机制(MKK6-P38调控轴)研究,抗炎、抗肿瘤、抗应激药物筛选与效果评估,以及相关实验室的常规检测。推荐检测体系:使用试剂盒配套酶标板,酶标仪(波长450nm),按照说明书步骤操作;样本稀释比例为1:10(组织匀浆可根据浓度适当调整),标准品浓度梯度为0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL,参考区间为0.2~1.3ng/mL(具体以说明书为准)。(具体样本处理方法请参考产品说明书)
1. 试剂盒需全程2-8℃避光冷藏储存,严禁-20℃冷冻或常温放置,避免温度波动导致试剂降解、抗体活性丧失;
2. 标准品、酶标二抗等试剂开封后,密封冷藏保存,1个月内用完,MKK6标准品避免反复冻融,防止其激酶结构破坏,底物液需避光保存;
3. 样本采集后及时处理,血清/血浆冷藏24小时内完成检测,细胞上清、组织匀浆冷藏或-20℃短期保存,48小时内完成检测,避免样本变质、MKK6降解;
4. 操作时严格遵循无菌规范,佩戴防护用品,避免试剂、样本接触皮肤黏膜;检测过程中控制孵育温度与时间,洗涤充分,避免未结合试剂残留导致结果偏差;
5. 底物液具有潜在刺激性,终止液为酸性溶液,操作时需谨慎,避免接触衣物与皮肤,检测完成后按生物安全规范处理废弃试剂与酶标板;
6. 细胞培养上清样本需在细胞对数期采集,离心去除细胞碎片后再进行检测,避免细胞杂质干扰检测结果;组织匀浆样本需充分破碎离心,去除组织碎片及杂质,确保检测准确性,尤其炎症组织、肿瘤组织样本需避免蛋白酶污染导致MKK6降解。
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以上信息仅供参考,具体请已产品说明书为准。