人蛋白激酶B试剂盒
人蛋白激酶B试剂盒核心产品涵盖检测试剂盒本体、配套标准品(含总Akt及磷酸化Akt标准品)、洗涤液、酶标试剂、显色液、终止液等全套组件,可提供不同规格(48Tests/盒、96Tests/盒)的产品,同时提供样本前处理辅助试剂及定制化检测解决方案、技术支持。该试剂盒采用酶联免疫吸附(ELISA)核心技术,遵循ELISA检测的经典原理与优化方案,针对人体样本中的人蛋白激酶B(总Akt)及磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)设计高特异性抗体,经严格筛选与验证,无明显交叉反应,可有效排除样本中杂蛋白、其他激酶、磷酸酶、细胞代谢产物及药物残留(如Akt抑制剂、信号通路调节剂)等干扰因素,检测范围宽、准确性高,可精准实现人蛋白激酶B含量、磷酸化水平及活性的三重定量检测,适配不同科研场景的检测需求。试剂盒适配人体血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液等常见样本,经规范前处理后可直接用于检测,广泛应用于肿瘤、糖尿病、神经退行性疾病、心血管疾病等的病理机制研究、Akt信号通路调控、磷酸化修饰与疾病关联研究、相关靶向药物(如Akt抑制剂、PI3K/Akt通路调节剂)的药效评估等科研场景,为肿瘤学、神经医学、心血管医学、内分泌学等相关领域的科研探索、药物研发提供核心检测工具,适配科研院所、生物医药企业、高校实验室及各级医院肿瘤科、神经内科、心血管内科、内分泌科科研部门。
检测原理
本试剂盒核心基于酶联免疫吸附(ELISA)原理,结合人蛋白激酶B(Akt)的免疫特性、磷酸化修饰特征及激酶活性,融合酶促反应优化检测灵敏度,实现对人体样本中该激酶含量、磷酸化水平及活性的三重精准定量检测,具体分为三个核心步骤:一是抗原包被,将人蛋白激酶B(总Akt)及磷酸化Akt特异性抗原分别包被于酶标板孔内,形成固相抗原,可特异性结合样本中的总Akt及p-Akt;二是抗原抗体结合与激酶活性反应,将经前处理的人体血清、组织匀浆、细胞裂解液等样本加入酶标孔,样本中的总Akt、p-Akt分别与对应固相抗原特异性结合,同时加入酶标记的Akt特异性抗体及Akt专属底物(含丝an酸/苏an酸位点的多肽),形成“固相抗原-Akt-酶标抗体"复合物,且样本中的Akt可催化底物磷酸化,体现其激酶活性;三是信号检测与定量,通过酶标仪分别检测总Akt、p-Akt对应的显色产物吸光度(反映总Akt含量及p-Akt水平),以及底物磷酸化产物对应的信号强度(反映Akt活性),吸光度与总Akt含量、p-Akt水平呈正相关,底物磷酸化效率与Akt活性呈正相关,结合标准品绘制的标准曲线,即可同步定量计算出样本中人蛋白激酶B的具体含量、磷酸化水平及活性水平。此外,试剂盒可通过优化反应体系,减少样本溶血、抗凝剂种类、信号通路类药物干预等因素对检测结果的干扰,提升检测准确性,同时避免杂蛋白、其他激酶的交叉干扰,确保检测数据的可靠性,契合ELISA实验对特异性和稳定性的核心要求。
产品特点
该试剂盒以“精准、便捷、稳定、特异性强、功能全面"为核心,贴合肿瘤学、神经医学、心血管医学等相关疾病科研及临床辅助检测的实际需求,核心特点突出。一是特异性强,采用高亲和力人蛋白激酶B(总Akt)及磷酸化Akt特异性抗体,可分别特异性识别总Akt及p-Akt(Ser473/Thr308),无明显交叉反应,能有效排除杂蛋白、其他激酶、磷酸酶、细胞代谢产物及药物残留等干扰因素,检测特异性达98%以上,适配总Akt、p-Akt及激酶活性的专项研究需求;二是灵敏度高,融合ELISA法与激酶活性检测的优势,检测下限低,可精准检测出样本中低浓度总Akt、微量p-Akt及低活性Akt,适配肿瘤早期机制研究、信号通路调控检测、药物干预后激酶活性变化检测等需求,助力疾病早期筛查、机制研究与病情监测;三是功能全面,可同步检测人蛋白激酶B的含量、磷酸化水平及激酶活性,无需额外试剂,一站式满足科研中对Akt表达、修饰及功能的三重检测需求,适配靶向药物药效评估、Akt信号通路机制研究、磷酸化修饰调控研究等场景;四是操作便捷,试剂盒提供全套配套试剂,样本前处理流程标准化(组织匀浆、细胞裂解液样本经简单离心去杂即可检测,可加入蛋白酶抑制剂、磷酸酶抑制剂防止Akt降解及去磷酸化),无需复杂实验设备,全程可在3-4小时内完成,适配各类实验室操作,同时针对细胞裂解液、肿瘤组织样本提供专属前处理指导,避免激酶活性丧失及磷酸化位点降解影响检测结果;五是稳定性好,试剂批间差、批内差均控制在合理范围,标准品(总Akt、p-Akt)线性关系良好,检测结果重复性强,每批产品均经过严格质控,确保实验数据可靠,可满足长期科研检测需求,符合科研实验对数据可重复性的核心要求;六是适配性广,可适配人体血清、血浆、组织匀浆、细胞裂解液等多种样本类型,兼容主流酶标仪,适用于肿瘤、神经退行性疾病、心血管疾病、代谢性疾病等各类相关的科研实验及临床辅助检测,同时可适配不同检测方法对应的参考范围需求。
适用样本类型
本试剂盒专为检测人体样本中的人蛋白激酶B(总Akt、p-Akt)含量及活性设计,适配的样本类型主要为人体体液及组织、细胞样本,核心包括:新鲜人血清样本、冷冻保存的人血清样本、新鲜人血浆样本(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝均可)、冷冻保存的人血浆样本、新鲜人体组织匀浆样本(如肿瘤组织、神经组织、心肌组织等)、冷冻保存的人体组织匀浆样本、新鲜人细胞裂解液、冷冻保存的人细胞裂解液,同时可适配经特殊处理的肿瘤细胞裂解液、神经细胞裂解液、心肌细胞裂解液样本。产品广泛应用于肺癌、肝癌、乳腺癌、糖尿病、阿尔茨海默病、心肌梗死等疾病的病理机制研究(如Akt信号通路异常、磷酸化修饰与细胞增殖凋亡、代谢调控的关联研究)、激酶活性评估、Akt相关靶向药物的药效评估、疾病复发监测等科研场景,适配科研院所、生物医药企业、高校实验室及各级医院的肿瘤科、神经内科、心血管内科、内分泌科科研部门,为相关领域的实验研究提供精准、可靠的检测支持,助力早期发现Akt含量、磷酸化水平及活性异常,为相关疾病的诊断、病情评估及治疗方案优化提供参考,同时可辅助开展Akt相关基因突变的遗传疾病研究。
备注:(具体样本处理方法请参考产品说明书)
储存与注意事项
储存方面,试剂盒未开封时需置于2~8℃冷藏环境中避光保存,有效期为6个月,禁止冷冻(蛋白激酶B相关试剂对温度敏感,冷冻易导致抗体失活、激酶活性丧失及磷酸化标准品降解);开封后,酶标板需密封保存,避免受潮、污染,配套试剂需按说明书要求分别冷藏或冷冻保存,酶标试剂、显色液、Akt专属底物需避光保存,防止失效;标准品(总Akt、p-Akt)溶解后需置于-20℃冷冻保存,避免反复冻融,建议分装保存,减少冻融损伤,契合激酶类、磷酸化蛋白类样本及试剂的储存规范。注意事项包括:产品仅供科研及临床辅助检测使用,不用于临床治疗诊断;样本前处理需严格遵循说明书操作,组织匀浆、细胞裂解液样本需同时加入蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂,防止Akt降解及去磷酸化,检测前需保证样本处于常温状态,避免样本溶血、污染影响检测结果;检测过程中需严格控制反应温度和时间,加样时确保加样量精准,避免交叉污染,规范执行ELISA实验的操作要求;酶标仪使用前需校准,确保检测波长准确(建议450nm);操作时需做好防护,避免试剂接触皮肤、黏膜,禁止共用吸头、离心管等耗材;过期试剂及污染样本严禁使用,详细安全信息请参照产品SDS文件;运输过程中需采用冷藏运输,避免高温、暴晒及剧烈震荡,组织、细胞样本运输需全程控温,确保试剂及样本稳定性,避免样本降解或磷酸化位点异常。
六、订购信息
如需获取产品详细资料、批次质检报告或报价方案,欢迎联系上海拜力生物科技有限公司获取技术支持与商务服务。
以上信息仅供参考,具体请已产品说明书为准。