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Swant抗体的制备工艺要求

更新时间:2025-11-14点击次数:171
  Swant抗体的制备工艺要求涉及多个关键环节,包括抗原设计与免疫、杂交瘤技术、抗体纯化与质控等。以下是具体分析:
  1.抗原设计与免疫
  抗原选择:Swant抗体针对特定钙结合蛋白(如Parvalbumin)设计,需确保抗原的高纯度(>90%)和特异性。例如,其单克隆抗体通过识别人源PV蛋白C端121-132氨基酸序列实现精准结合。
  动物免疫:选用小鼠或豚鼠作为宿主动物,免疫时需加入福氏佐剂以增强抗原性,并通过皮下或背部多点注射延长抗原在体内的存留时间。
  2.细胞融合与筛选
  杂交瘤技术:将免疫后的动物脾细胞与骨髓瘤细胞融合,形成既能无限增殖又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞。此过程需严格无菌操作,并使用HAT培养基筛选成功融合的细胞。
  克隆化与验证:通过有限稀释法实现单克隆化,并利用ELISA、免疫组化等方法检测抗体特异性。例如,Swant的抗PV单抗经WB/IHC双重验证,确保无交叉反应。
  3.Swant抗体纯化与质控
  层析工艺:采用Protein A亲和层析捕获抗体,结合离子交换和凝胶过滤层析进一步去除宿主细胞蛋白(HCP)、DNA残留及聚集体。最终产品纯度需>95%。
  病毒清除:通过低pH孵育(pH 3.0–4.0)和除病毒过滤器组合,确保脂包膜病毒的安全性。
  稳定性保障:成品需在-20℃避光保存,活性维持>90%长达24个月。加速稳定性试验验证其耐受温度波动的能力。
  4.分装与定制服务
  冻干处理:部分产品以冻干形式分装(如100μl/支),重构后用于实验,避免防腐剂干扰。
  灵活规格:提供50μg试销装及标记服务(HRP/FITC/Cy3),满足不同实验需求。
 

 

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