1、扩增:不同的干细胞,其扩增方法不同。如造血干细胞为悬浮培养,而肿瘤干细胞则为贴壁培养的细胞。
2、消化:根据细胞耐受性的不同,有多种方法,如机械法,化学法,以及胶原酶、胰酶消化等不同方法。
3、冻存:取处于对数期的干细胞,消化,并吹打为单细胞悬液,用2X培养基重悬细胞后,将等体积DMSO逐滴加入细胞悬液中,轻轻吹打混匀,重悬细胞于冻存管中,并置于冻存盒中,冻存盒放入-80℃冰箱。
4、分化:鉴定干细胞的一项重要指标就是它的分化能力。一般分化采取加入细胞因子诱导、共培养、小分子刺激等方法。
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