细胞的冻存操作

一、用品1、5%胰蛋白酶2、含10%~20%血清培养液3、DMSO或无色新鲜甘油（15磅蒸汽高压消毒）4、吸管、离心管、冻存管二、操作步骤1、从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存，但是对数生长期的细胞，已将长满的细胞冻存后生存率低。在冻存前一天换一次培养液。2、用胰蛋白酶把单层生长的细胞消化下来，悬浮生生长的细胞则不需要处理。依据传代方法把消化好的细胞收集于离心管并计数，离心。3、去除胰蛋白酶及旧的培养液，加入配好的冻存培养液（含10%的DMSO或甘油），...

查看更多

PCR反应之模板核酸的制备

①模板中含有杂蛋白质；②模板中含有Taq酶抑制剂；③模板中蛋白质没有消化除净，特别是染色体中的组蛋白；④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。⑤模板核酸变性不*。在酶和引物质量好时，不出现扩增带，极有可能是标本的消化处理，模板核酸提取过程出了毛病，因而要配制有效而稳定的消化处理液，其程序亦应固定不宜随意更。相关产品信息：冻存管,冻存盒,管鼓盖,加样槽,PCR板,PCR管架,Sigma现货,Abcam抗体,GE试剂,Amresco试剂

查看更多

抗体与免疫球蛋白的关系

1、抗体是与抗原相对应的一个概念，着重点在抗体是与抗原相对应的一个概念其生物学活性；2、免疫球蛋白是结构和化学本质上的概念；3、抗体都是免疫球蛋白，免疫球蛋白质并非都是抗体，它包括抗体球蛋白、是抗体，它包括抗体球蛋白、异常免疫球蛋白等。白等。如骨髓瘤患者血清中的骨髓瘤蛋白，其化学结构与Ab如骨髓瘤患者血清中的骨髓瘤蛋白，其化学结构与Ab相似，但无Ab活性，没有免疫功能，不能称为AbAb活性Ab。相似，但无Ab活性，没有免疫功能，不能称为Ab。4、通常情况下二者可通用。γ球蛋白...

查看更多

抗体的三大规律

一、初次反应产生抗体当抗原*次进入机体时，需经一定的潜伏期才能产生抗体，且抗体产生的量也不多，在体内维持的时间也较短。二、再次反应产生抗体当相同抗原第二次进入机体后，开始时，由于原有抗体中的一部分与再次进入的抗原结合，可使原有抗体量略为降低。随后，抗体效价迅速大量增加，可比初次反应产生的多几倍到几十倍，在体内留存的时间亦较长。三、回忆反应产生抗体由抗原刺激机体产生的抗体，经过一定时间后可逐渐消失。此时若再次接触抗原，可使已消失的抗体快速上升。如再次刺激机体的抗原与初次相同，则...

查看更多

抗体结构介绍

抗体是具有4条多肽链的对称结构，其中2条较长、相对分子量较大的相同的重链（H链）；2条较短、相对分子量较小的相同的轻链（L链）。链间由二硫键和非共价键联结形成一个由4条多肽链构成的单体分子。轻链有κ和λ两种，重链有µ、δ、γ、ε和α五种。整个抗体分子可分为恒定区和可变区两部分。在给定的物种中，不同抗体分子的恒定区都具有相同的或几乎相同的氨基酸序列。可变区位于"Y"的两臂末端。在可变区内有一小部分氨基酸残基变化特别强烈，这些氨基酸的残基组成和排列顺序更易发生变异区域...

查看更多

抗体的生物活性

1、特异性结合抗原：抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞，通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤。然而，抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合，直接发挥中和病毒的作用。2、激活补体：IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体，凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体。3、结合细胞：不同类别的免疫球蛋白，可结合不同种的细胞，参与免疫应答。4、可通过胎盘及粘膜：免疫球蛋白G（IgG）能通过胎盘进入胎儿血流中，使胎儿形成...

查看更多

选购抗体前须知的五大信息

1、Antigen也就是抗原名称,是英文全称,许多客户只说简称,要知道不同的抗体其简称有可能会一样的.有中文也提供一下.­2、Reactivity即反应性,也就是实验用于什么特种,是人,大鼠还是小鼠等。3、Host宿主,就是抗体来源,这个主要和二抗有关系,一抗必须要和二抗搭配,比如,二抗是羊抗小鼠,一抗就要选择小鼠来源的。不少客户常常是先有二抗,再买一抗,受限制得很,其实应该先订一抗,再买二抗,毕竟一抗贵,为了将就一个100元左右的二抗,而把几千元的一抗的订购弄得很复杂,真是...

查看更多

生化试剂相关问题简析

一、样品信息样品的溶血、脂血、黄疸等会对测定结果产生非化学反应的干扰。因此，应根据溶血、脂浊、黄疸的光谱吸收特性，采用双波长或多波长的检测模式，并在结果计算中扣除因溶血、脂血、黄疸引起的影响，减少干扰程度。二、测定范围每种待测物都有一个可测定的浓度或活性范围，样品结果若超过此范围，分析仪将显示结果超过范围的提示。表示试剂已经变质，应更换合格试剂。三、底物耗尽使用连续监测法、两点法测定酶活性时，若酶活性非常高，底物接近被耗尽，吸光度上升或下降会超过某一吸光度变化范围，监测期的吸...

查看更多