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细胞株冻存条件及方法

更新时间:2012-11-02点击次数:282

1、冻存条件:建议采用40-50%FBS+8%-10%DMSO+该细胞株无血清培养基

2、冻存方法:

①梯度冻存:4℃——1h;-20℃——30min;-80℃——过夜

②使用冻存盒:直接放入-80℃冰箱中过夜(有些细胞不适应此种方法)

3、复苏方法:

①打开水浴,将培养基放入水浴中,待其稳定至37℃;

②细胞从液氮内取出后,应快速将细胞放于37℃水浴中,轻轻振摇,使其溶化,(尽量避免溶化前冻存管脱离水浴);

③将溶化后将细胞冻存悬液离心,转速1000rpm,3min,后弃去上清,使细胞重悬在新鲜培养液中,进行培养;

④细胞在培养箱中贴壁24h后,更换新鲜培养基,待其长满,进行传代。



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