一、化冻
将血清(FetalBovineSerum,Hyclone)从-20℃冰箱取出,放于4℃冰箱化冻过夜;也可室温(或浸于自来水中)化冻,化冻后若不马上灭活,可以放入4℃冰箱暂时保存;
二、灭活
1、放入室温的水浴锅内开始加热(同时放入一个内装200ml自来水的血清瓶,插入一根温度计,温度监控以此为准);
2、当温度计显示56℃时,控制在此温度30分钟±3分钟;若不小心使温度上升超过56℃,则:若仍未超过60℃,且时间很短(比如:不超过5分钟),则仍可使用;若超过60℃,或者时间较长,则弃去不用,或者尝试用于ME细胞的培养;
3、取出,自然冷却至室温(约需1-3小时),可分装或-20℃继续冻存。
三、分装
1、转入细胞间,用移液器将血清分装,注意预先要将血清轻轻摇动数周、混匀;吹出血清时要注意:不要吹出气泡(血清很粘稠,很容易产生气泡;如果已产生气泡,则在酒精灯火焰上过一下);标好批号和日期;
2、放入-20℃冰箱冻存(分装一次大约可以使用1—2个月)。
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