免疫组织的五种化学染色法

1、直接

2、间接法

3、未标记抗体法

   抗体和酶、荧光素结合后，或多或少的降低了抗体与抗原的结合能力。有酶桥法和PAP法，但前者弊端较多。PAP法（PeroxidaseAntiperoxidase.PAP）PAP复合物（二分子抗体，三分子酶），体积小，稳定，穿透性好特点：较间接法敏感20~100倍，较前几种方法非特异性染色轻。

4、ABC法（Avidin-Biotin-ComplexMethod）

   Avidin——卵白素，有四个亚单位，每个亚单位有138个氨基酸，分子两68kD。一个卵白素分子能与4个分子的生物素结合，基本上不可逆，比抗原抗体结合力大1000000倍，只有在pH1.5的条件下才能将其分离。Biotin——生物素，一分子的抗体可结合150个生物素分子，和多种酶结合后，不影响催化活性。

5、LAB法（LabeledAvidin-Biotin）

   特点：1、敏感性较PAP法提高20~40倍；2、非特异性染色几乎没有；3、可用于IHC，核酸杂交等。



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